Protocoles d'analyses du sperme et des interactions spermatozoïdes - glaire cervicale

Préparation des échantillons de liquide séminal pour dosages biochimiques

Centrifuger le sperme pendant 10 min. à 1500-2000 xg.

Stockage des échantillons -20°C

• Pour le zinc: Un tube (1,5 ml type Eppendorf) avec 40 µl de plasma séminal.
• Pour le fructose: Deux tubes (1,5 ml type Eppendorf) avec 70 µl = 140 µl de plasma séminal.
• Pour la carnitine: Deux tubes (1,5 ml type Eppendorf) avec 150 µl = 300 µl de plasma séminal.

Préparation des échantillons pour les analyses

Pour le zinc

20 µl plasma séminal → Analyses

Pour le fructose

50 µl plasma séminal + 50µl NaCl 0.9% → mélanger → 50 µl plasma séminal / NaCl 0.9% + 500 µl HClO4 0.33N → mélanger → centrifuger 10 min. / Vmax → 50 µl surnageant → Analyses

Pour la carnitine

125 µl plasma séminal + 625µl HClO4 0.6N → 10 min. dans la glace → centrifuger 10 min. / Vmax → 500 µl surnageant + 300 µl K2CO3 0.5M → 10 min. dans la glace → centrifuger 10 min. / Vmax → 500 µl surnageant → Analyses